Dynamic expression of desmin, α-SMA and TGF-β1 during hepatic fibrogenesis induced by selective bile duct ligation in young rats

We previously described a selective bile duct ligation model to elucidate the process of hepatic fibrogenesis in children with biliary atresia or intrahepatic biliary stenosis. Using this model, we identified changes in the expression of alpha smooth muscle actin (α-SMA) both in the obstructed parenchyma and in the hepatic parenchyma adjacent to the obstruction. However, the expression profiles of desmin and TGF-β1, molecules known to be involved in hepatic fibrogenesis, were unchanged when analyzed by semiquantitative polymerase chain reaction (RT-PCR). Thus, the molecular mechanisms involved in the modulation of liver fibrosis in this experimental model are not fully understood. This study aimed to evaluate the molecular changes in an experimental model of selective bile duct ligation and to compare the gene expression changes observed in RT-PCR and in real-time quantitative PCR (qRT‐PCR). Twenty-eight Wistar rats of both sexes and weaning age (21-23 days old) were used. The rats were separated into groups that were assessed 7 or 60 days after selective biliary duct ligation. The expression of desmin, α-SMA and TGF-β1 was examined in tissue from hepatic parenchyma with biliary obstruction (BO) and in hepatic parenchyma without biliary obstruction (WBO), using RT-PCR and qRT‐PCR. The results obtained in this study using these two methods were significantly different. The BO parenchyma had a more severe fibrogenic reaction, with increased α-SMA and TGF-β1 expression after 7 days. The WBO parenchyma presented a later, fibrotic response, with increased desmin expression 7 days after surgery and increased α-SMA 60 days after surgery. The qRT‐PCR technique was more sensitive to expression changes than the semiquantitative method.

Métodos de prevención de las alteraciones estructurales pulmonares en la hernia diafragmática congénita. Estudio experimental con cirugía fetal / Preventive methods of the lung alterations in congenital diaphragmatic hernia. Experimental study with fetal surgery

La hipoplasia pulmonar es la causa de muerte en el 30 al 50 por ciento de los recién nacidos con hernia diafragmática congénita. La ligadura traqueal en el feto, previene esta alteración, estimulando el crecimiento de la vía aérea. El objetivo principal de este trabajo es investigar un método de prevención de la hipoplasia pulmonar, basado en la administración intraamniótica de drogas, pasible de ser utilizado en la especie humana. Fueron operadas 36 conejas en el día 24 de gestación. En el primer grupo de fetos se creó una hernia diafragmática. En otros tres grupos además de la hernia diafragmática se efectuaron tres procedimientos adicionales: a) ligadura traqueal b) administración intraamniótica de dexametasona c) administración intraamniótica de surfactante. Se tomó como grupo control a 14 fetos, no operados, en el día 30, se efectuó una cesarea y se procedió a canular la tráquea de todos los animales para medir los parámetros funcionales (curvas de histéresis y de compliance). Los pulmones fueron recolectados para estudios biométricos: peso, volúmen e histología (evaluación cualitativa) y estudios histomorfométricos: densidad de septos alveolares, número de alvéolos por mm y evaluación de la densidad de fibras elásticas y colágenas. Se observó que la hernia diafragmática provocó una disminución significativa en el peso y volúmen de ambos pulmones, con caída de la histéresis y la complacencia, espesamiento de los septos alveolares, disminución del contenido en fibras elásticas y aumento del colágeno. La administración de surfactante y corticoides intraamnióticos produjeron efectos similares a los de la ligadura traqueal, corrigiendo parcialmente las alteraciones pulmonares en los fetos con hernia diafragmática, presentando el surfactante efectos más acenntuados. Concluímos que la administración intraamniótica de surfactante o dexametasona pueden subsistir a la ligadura traqueal como método experimental de prevención de la hipoplasia pulmonar, presente en los fetos con hernia diafragmática congénita